Tratamento sistêmico com droga AVI-4658 demonstra a ocorrência de salto de exon e produção de distrofina em pacientes com distrofia muscular de Duchenne

Bothell, WA, EUA- 22 de dezembro de 2009 – A AVI BioPharma, Inc., empresa que desenvolve drogas baseadas em RNA, divulgou hoje dados iniciais de eficácia do teste clínico em andamento, Fase 1b/2, relativo à droga AVI-4658, que objetiva tratar de forma sistêmica pacientes portadores de Distrofia Muscular de Duchenne (DMD), uma doença genética causada pela falha na produção de distrofina, e que conduz à perda muscular progressiva.

Os pacientes dos primeiros quatro grupos (de um total de cinco) que completaram as 12 semanas do tratamento com diferentes doses da AVI-4658 (0,5/1,0/2,0 ou 4,0 mg/kg), passaram por biópsia muscular. As análises das biópsias pós-tratamento dos pacientes que receberam doses de 2 e 4 mg/kg da droga (3 de 3 no total), apresentaram RNAs mensageiros perfeitamente processados (splicing) para produzir distrofina. Um desses pacientes, pertencente ao grupo de 2mg/kg, apresentou uma robusta expressão de distrofina, como pôde ser verificado pelas análises Western Blot e de imunofluorescência. Após o término do tratamento não foram detectados sinais de RNA, ou de produção de proteínas, nos pacientes dos grupos de 0,5 e 1,0 mg/kg. A restauração da produção de distrofina funcional é considerada um item essencial para o sucesso do tratamento da DMD.

Nos três pacientes do grupo de doses de 2,0 e 4,0 mg/kg, o tratamento com a AVI-4658 conduziu precisamente ao salto do exon 51, o que acredita-se necessário para restaurar o quadro de leitura do RNA mensageiro (mRNA) em pacientes com essa classe de mutação. A análise das biópsias pós-tratamento, efetuadas pela técnica de transcriptase reversa, apresentou uma nova banda de RNA de menor peso molecular, resultante do salto, ou exclusão planejada, do exon 51. A intensidade da banda de RNA de maior peso molecular (que incluiu o exon 51) foi correspondentemente reduzida. Em um dos pacientes do grupo que recebeu dosagens de 2,0 mg/kg, o aparecimento de RNA “saltado” foi acompanhado de uma robusta expressão de distrofina na amostras obtidas após o tratamento, analisadas tanto por Western Blot quanto por imunofluorescência. A análise Western Blot detectou um incremento de até cinco vezes na expressão de distrofina, variando de 0,9% a 5,3% do normal. A análise por imunofluorescência das biópsias musculares desses pacientes apresentou um aumento na percentagem de fibras musculares positivas para distrofina, de 1% antes do tratamento, para 21% das fibras nas biopsias pós-tratamento. A análise quantitativa da intensidade da quantidade de distrofina por fibra, em amostras obtidas de paciente antes e depois do tratamento com a droga, exibiu um aumento de sete vezes na distrofina. Quando comparada ao nível de distrofina existente em fibras musculares normais, a quantidade de distrofina por fibra muscular saiu de 5% antes do tratamento, para 37% nas biópsias após o tratamento.

O professor Francesco Muntoni, professor de Neurologia Pediátrica, e titular do Centro Neuromuscular Dubowitz, da University College London, Inglaterra, declarou: “Estou muito encorajado pelas evidências de um salto preciso do exon 51 em três pacientes tratados. Esses resultados sugerem que estamos no rumo certo para o desenvolvimento de uma droga que atue positivamente no tratamento da DMD. O fato de que um paciente da faixa de dosagens de 2 mg/kg apresentou significativa expressão de distrofina, nos leva a crer em níveis ainda maiores de expressão nos tratamentos com doses mais elevadas, de 10,0 mg/kg e 20,0 mg/kg da AVI-4658, e que estão em andamento no teste clínico.

Planejamento do teste clínico e novas informações

O Estudo 28 consiste em um teste de faixas de dosagens Fase 1b/2, aberto, com o intuito de avaliar a segurança, tolerância, farmacocinética e eficácia da droga AVI-4658 em meninos com DMD que ainda deambulam, com idades entre 5 e 15 anos, e que possuem um erro de codificação na distrofina passível de tratamento com o salto do exon 51.

Os pacientes receberão a droga via infusão intravenosa uma vez por semana, durante 12 semanas. Ao todo, dezenove pacientes foram inscritos no teste e incluídos em um dos seis grupos de dosagens: 0,5/ 1,0/ 2,0/ 4,0/ 10,0 ou 20,0 mg/kg. Após receberem as doses correspondentes, os pacientes foram acompanhados por um período adicional de 14 semanas. O objetivo básico do teste é avaliar, durante 26 semanas, a segurança da AVI-4658 nas doses programadas.

Até a presente data, nove dentre dez pacientes pertencentes aos primeiros quatro grupos (0,5 até 4,0 mg/kg) receberam o total das doses programadas. Apenas um dos pacientes do grupo de 4mg/kg desligou-se do tratamento, por problemas de cardiomiopatia relacionada à DMD, agora estabilizada, e acredita-se, não tendo tido relação com a droga. Um paciente adicional foi inscrito no grupo de 4 mg/kg, mas ainda não completou sua programação de doses. Todos os pacientes dos sexto e quinto grupos, programados para receber, respectivamente, 10 e 20 mg/kg , já iniciaram o tratamento.

Os dados obtidos dos pacientes que já findaram suas doses programadas, demonstram que a AVI-4658 continua, de uma forma geral, bem tolerada. Eventos adversos reportados até o momento são, em sua maioria, leves, não relacionados ao tratamento com a droga, e transitórios. Dois eventos adversos sérios, considerados sem correlação com a AVI-4658, foram reportados em diferentes pacientes que haviam completado a programação de 12 semanas, e durante o tempo posterior de acompanhamento de 14 semanas.

Estudos rumo à requisição de IND (Investigação de Novas Drogas nos Estados Unidos)

A AVI BioPharma completou uma série de estudos pré-clínicos de 12 semanas da droga AVI-4658, sob as orientações das normas (GLP) (Boas Práticas no Laboratório), obrigatórias para a abertura de uma requisição IND (Investigação de Novas Drogas) nos Estados Unidos. O estudo testou doses de até 960 mg/kg, tanto em camundongos mdx (modelo da distrofia), quanto em ratos tipo linhagem selvagem (WTM), e de até 320 mg/kg em primatas não-humanos, ambas representando as maiores doses únicas possíveis para esses animais. Em todos os casos, a PMO foi bem tolerada em doses humanas equivalentes de 80 mg/kg e de 110 mg/kg respectivamente (baseada na escala alométrica padrão), sugerindo potencial para um índice terapêutico amplo.

Um estudo adicional no padrão GLP, da droga AVI-4245 para salto do exon 23 em camundongos mdx (modelo animal da distrofia), foi também completado com resultados similares que encorajam boa tolerabilidade. No momento a histopatologia está sendo revista, mas relatórios iniciais sugerem que os músculos dos camundongos tratados apresentaram melhoras ao longo das 12 semanas do estudo.

A AVI-4658 continua apresentando o bom perfil de segurança das drogas candidatas baseadas em PMO (morfolinos). Dados das recentes séries de estudos pré-clínicos, já concluídos, e necessários para iniciar uma Investigação de Novas Drogas nos Estados Unidos (IND), sugerem que esta boa tolerabilidade deverá continuar nas doses mais elevadas. Isso é de essencial importância, uma vez que qualquer droga para a DMD baseada em salto de exon, deverá ser administrada regularmente ao longo de toda a vida do paciente.

O teste clínico com a AVI-4658 está sendo efetuado em Londres, Inglaterra, no Instituto para Saúde da Criança do UCL (University College London), e nas instalações do Great Ormond Street Hospital NHS Trust, de Londres, por membros do consórcio MDEX conduzido pelo professor Muntoni, e por Kate Bushby no Royal Victoria Infirmary, Newcastle-Upon-Tyne, Reino Unido, que é o centro de coordenação da organização européia Treat Neuromuscular Diseases (http://www.treat-nmd.eu/home.php).

Os custos clínicos para o teste são mantidos, em parte, pelo Conselho de Pesquisa Médica do Reino Unido.

Tradução : Marcelo D. P. de Oliveira. contato: trad.mdpo"arroba"gmail.com

Fonte: http://www.avibio.com/news_detail.php?newsId=0068